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對熒光分光光度計(jì)感興趣?看過來!

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熒光分光光度計(jì)是一種定性、定量分析的儀器。它利用熒光物質(zhì)在特定波長光的激發(fā)下發(fā)出熒光的特性,通過測量熒光光譜,來獲取物質(zhì)的相關(guān)信息。其主要組成部分包括光源、單色器、樣品池、檢測器以及信號處理系統(tǒng)等。以下是對其各部分的具體介紹以及主要的功能:

熒光分光光度計(jì)的光學(xué)系統(tǒng)主要由以下部分組成:1. **激發(fā)光源**:    - **常用光源類型**:        - **氙燈**:能發(fā)出強(qiáng)度大、譜線連續(xù)的光,分布于200 - 700nm 光域內(nèi),且在 300 - 400nm 波段內(nèi)射線強(qiáng)度幾乎相等,是目前熒光分光光度計(jì)中應(yīng)用較為廣泛的光源。不過,氙燈的電源功率要求大,電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。        - **高壓汞燈**:發(fā)射強(qiáng)度大且穩(wěn)定,可發(fā)射特定的線狀譜線,如 365nm、405nm、436nm 等譜線,在一些特定的熒光分析中會使用。        - **激光**:具有單色性好、光強(qiáng)度大、脈沖激光的光照時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),可以避免某些感光物質(zhì)的分解,常用于對光源單色性要求較高的實(shí)驗(yàn)。    - **光源作用**:為樣品提供特定波長的激發(fā)光,使樣品中的熒光分子被激發(fā),從而產(chǎn)生熒光。

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2. **單色器**:    - **激發(fā)單色器**:也稱為第一單色器,位于光源和樣品池之間。其作用是從光源發(fā)出的光中選擇出特定波長的激發(fā)光,過濾掉不需要的光,以保證只有所需波長的光照射到樣品上。    - **發(fā)射單色器**:又稱第二單色器,位于樣品池和檢測器之間。樣品受激發(fā)后發(fā)出的熒光包含各種波長,發(fā)射單色器將這些熒光進(jìn)行色散,分離出不同波長的熒光,以便檢測器能夠檢測到特定波長的熒光信號。    - **單色器的組成**:通常由光柵、透鏡、狹縫等部件組成。光柵是單色器的核心部件,通過對光的衍射作用將不同波長的光分開;透鏡用于聚焦和準(zhǔn)直光線;狹縫則用于控制通過的光的寬度,從而調(diào)節(jié)光譜的分辨率和光強(qiáng)。

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3. **樣品室**:    - **樣品池材質(zhì)**:一般用石英制成,因?yàn)槭晒獾奈蘸蜕⑸漭^小,且四面均透光,能夠保證激發(fā)光充分照射到樣品上,同時(shí)使樣品發(fā)出的熒光能夠有效地透過樣品池被檢測到。    - **樣品池形狀**:常見的有正方形、長方形或圓形,其中正方形樣品池由于散射干擾較少,較為常用。    - **特殊樣品室設(shè)計(jì)**:對于一些需要在特定溫度條件下進(jìn)行測量的樣品,樣品室可能具備溫控功能,以模擬不同的環(huán)境條件。在低溫?zé)晒鉁y定時(shí),樣品池外套一個(gè)液氮的透明石英真空瓶,以保持樣品處于低溫狀態(tài)。4. **檢測器**:    - **常用檢測器類型**:光電倍增管是熒光分光光度計(jì)中最常用的檢測器,其具有靈敏度高、響應(yīng)速度快等優(yōu)點(diǎn),能夠?qū)⑽⑷醯臒晒庑盘栟D(zhuǎn)化為電信號。此外,隨著技術(shù)的發(fā)展,一些新型的檢測器如電荷耦合器件(CCD)等也逐漸應(yīng)用于熒光分光光度計(jì)中。    - **檢測器的性能要求**:檢測器需要對熒光信號有較高的靈敏度,能夠檢測到微弱的熒光強(qiáng)度;同時(shí),要有較低的噪聲水平,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。并且,檢測器的響應(yīng)波長范圍要與熒光分光光度計(jì)的測量波長范圍相匹配。5. **光路系統(tǒng)**:    - **光路布局**:為了消除激發(fā)光對熒光測量的干擾,激發(fā)光路和發(fā)射光路通常呈直角布置。這樣可以使激發(fā)光在照射樣品后,產(chǎn)生的熒光能夠盡可能少地受到激發(fā)光的影響,從而提高檢測的準(zhǔn)確性。    - **光路元件**:包括反射鏡、透鏡、光纖等,用于引導(dǎo)和傳輸光線,保證激發(fā)光準(zhǔn)確地照射到樣品上,以及樣品發(fā)出的熒光能夠順利地傳輸?shù)綑z測器中。


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